名稱：小鼠胚胎干細(xì)胞CE-3

種屬：小鼠

組織來源:胚胎

生長特征:貼壁細(xì)胞

生長形態(tài):上皮維

培養(yǎng)體系:90%DMEM(高糖）培養(yǎng)基+10%胎牛血清+1%雙抗

背景描述:CE3細(xì)胞系衍生自D3ES細(xì)胞系

傳代比例:1:21:3

培養(yǎng)條件:溫度：37℃氣象：空氣95%；CO2：5%

細(xì)胞凍存:90%FBS+10%DSMO；推薦使用無血清凍存液

儲(chǔ)存-80°；長期保存液氮

倍增時(shí)間:36hours消化3-5分鐘

收到細(xì)胞后請第1時(shí)間觀察拍照并嚴(yán)格按照以下要求進(jìn)行操作（需遵照無菌操作要求）。

細(xì)胞接收處理：

1.觀察包裝有無漏液、渾濁、破損等情況。有問題請及時(shí)拍照反饋銷售人員。

2.用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)淖睿棉k法，因經(jīng)過運(yùn)輸貼壁細(xì)胞可能會(huì)有少許脫落；不用擰開培養(yǎng)瓶蓋.將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí),穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3.3-4小時(shí)后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，觀察、拍照，觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況4.貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%.可正常傳代;細(xì)胞密度若小于80%,可將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基吸出，預(yù)留5ml-6ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),細(xì)胞密度超過80%可再次傳代操作。懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打重懸。鏡下觀察時(shí)，若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。